交叉配血試驗

  交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù)，兩側(cè)均不凝集可輸血。將獻(xiàn)血人的紅細(xì)胞和血清分別與受血人的血清和紅細(xì)胞混合，觀察有無凝集反應(yīng)，這一試驗稱為交叉配血試驗。

交叉配血試驗包括主試驗和副試驗兩種。前者用受血者血清與供血者紅細(xì)胞懸液作試驗以發(fā)現(xiàn)受血者血清中是否含有與供血者紅細(xì)胞反應(yīng)的抗體。又稱直接配合或主側(cè)配合；后者則用供血者血清與受血者紅細(xì)胞作試驗以發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體，又稱間接配合。

臨床意義：在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過交叉配血試驗進(jìn)一步證實受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原一抗體反應(yīng)，以保證受血者的輸血安全。因輸血直接涉及病人的生命安全，故病人與獻(xiàn)血員雖屬同一血型也應(yīng)進(jìn)行交叉配血。交叉配血是確定能否輸血的重要依據(jù)，兩側(cè)均不凝集可輸血。若獻(xiàn)血人紅細(xì)胞與受血人血清（主側(cè)）發(fā)生凝集應(yīng)禁止輸血；主側(cè)不凝集，次側(cè)（獻(xiàn)血人血清與受血者紅細(xì)胞）凝集，必要時可少量、慢速輸血。交叉配血不能只進(jìn)行鹽水介質(zhì)交叉配血，在條件差的實驗室也應(yīng)該進(jìn)行特殊介質(zhì)配血，以盡量消除不完全抗體存在的危害，減少輸血引起的不良反應(yīng)。

背景原因：ABO血型是根據(jù)紅細(xì)胞膜上存在的凝集原A與凝集原B的情況而將血液分為4型。凡紅細(xì)胞只含A凝集原的，即稱A型；如存在B凝集原的，稱為B型；若A與B兩種凝集原都有的稱為AB型；這兩種凝集原都沒有的，則稱為O型。不同血型的人的血清中各含有不同的凝集素，即不含有對抗內(nèi)他自身紅細(xì)胞凝集原的凝集素。在A型人的血清中，只含有抗B凝集素；B型人的血清中，只含有抗A凝集素；AB型人的血清中沒有抗A和抗B凝集素；而O型人的血清中則含有抗A和抗B凝集素。在ABO系統(tǒng)血型相同的人之間進(jìn)行輸血，在輸血前必須進(jìn)行交叉配血試驗（cross-match test），即不僅把供血者的紅細(xì)胞與受血者的血清進(jìn)行血清配合試驗（這稱為試驗主側(cè)）；而且要把受血者的紅細(xì)胞與供血者的血清作配合試驗（這稱為試驗的次側(cè)）。這樣，既可檢驗血型測定是否有誤，又能發(fā)現(xiàn)他們的紅細(xì)胞或血清中，是否還存在一些其它的凝集原或凝集素，足以引起紅細(xì)胞凝集反應(yīng)。在進(jìn)行交叉式配血試驗時，應(yīng)在37℃下進(jìn)行，以保證可能有的凝集反應(yīng)得以充分顯示。

試驗方式：交叉配血試驗有多種方式，如鹽水法、酶技術(shù)配血法、膠體介質(zhì)配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。微柱凝膠試驗微柱凝膠試驗(Microtubes Gel Test，MGT)是20世紀(jì)90年代先后進(jìn)入國內(nèi)實驗室并用于交叉配血的新方法。在一些先進(jìn)國家已成為常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)。而凝聚胺用于不完全抗體的測定與鑒定以及交叉配血等血清學(xué)試驗也已在國內(nèi)迅速推廣使用。該方法簡便、時間短、結(jié)果明顯。

試驗材料和試劑：診斷用人血型抗A血清、診斷用人血型抗B血清（常在血清中加入不同顏色的染料以示區(qū)別，如A型紅色，B型藍(lán)色）、生理鹽水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%紅細(xì)胞懸液、受血者的2%紅細(xì)胞懸液。

器具：凹玻片或載玻片、小試管、尖嘴滴管、無菌刺血針、牙簽、酒精棉球、無菌干棉球、試管架、顯微鏡、記號筆等。

操作過程：

1、首先準(zhǔn)備好受血者和獻(xiàn)血者的血樣。

2、分別用生理鹽水配好用受血者2·5%的紅細(xì)胞鹽水懸液、獻(xiàn)血者2·5%紅細(xì)胞鹽水懸液。

3、主側(cè)加受血者血清0.5ml，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞鹽水懸液0.5ml。

4、次側(cè)加獻(xiàn)血者血清0.5ml，受血者紅細(xì)胞鹽水懸液0.5ml。

5、混勻后，根據(jù)所用交叉配血方式，如酶技術(shù)配血法，可在37度水浴箱孵育1小時后，直接觀察有無凝集或溶血；若選用鹽水介質(zhì)等方法，則需1000rpm離心1min；或選用一定的速度離心相應(yīng)的時間，如聚凝胺試劑提供的轉(zhuǎn)速和時間。

結(jié)果觀察：先觀察上清液的顏色，然后再輕搖試管觀察有無紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象發(fā)生；

結(jié)果判定：如試管內(nèi)紅細(xì)胞呈均勻混濁無顆粒出現(xiàn)即無凝集，上清液呈正常血清狀顏色為交叉配血試驗相合。如上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，紅細(xì)胞成塊即為凝集現(xiàn)象，為交叉配血試驗不相合。

注意事項：

待檢紅細(xì)胞懸液不宜過稀或過濃；

所用的試劑必須在有效期內(nèi)；

氣溫較高時，為防止標(biāo)本干涸所致的假陽性，可將玻片放入有一濕棉球的平皿中。若室溫過低，可將玻片置于28℃右右的溫箱中；

注意區(qū)分紅細(xì)胞的疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象。前者滴加生理鹽水1～2滴混勻后，紅細(xì)胞即可分散成渾濁狀，而后者則不因此而改變；

利用已知A型和B型紅細(xì)胞與一系列稀釋的待檢血清作凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集效價（以出現(xiàn)凝集的最高稀釋度）的高低可作為判斷體液免疫功能的一項指標(biāo)。多數(shù)免疫功能正常的半歲嬰兒，除AB型外，血清中相應(yīng)的抗A效價≥1:8，抗B效價≥1:4。一歲后，凝集效價也相應(yīng)提高。